甲基化(Methylation)位点检测
DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一，它可以抑制基因的表达。甲基化通常发生在胞嘧啶的C5位，形成5-甲基胞嘧啶(5mC)，甲基化的胞嘧啶多位于CpG岛上。甲基化特异性PCR (MSP)是一种检测基因组DNA甲基化水平的常用方法。该法是将DNA经亚硫酸氢钠处理，非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变。在PCR反应时，设计两套不同的引物对：一对引物序列针对经亚硫酸氢钠处理后的甲基化DNA链设计，若用该对引物能扩增出片段，说明该检测位点发生了甲基化；另一引物针对经亚硫酸氢钠处理后的非甲基化DNA链设计，若用该对引物能扩增出片段，说明该检测位点没有甲基化。两对引物都具有很高的特异性，与未经处理的DNA序列无互补配对。 |
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