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Cycleave®PCR Mycoplasma Detection Kit

Cycleave®PCR Mycoplasma Detection Kit 品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 Takara CY232 50 次 1,500 元
制品内容 (25 μl反应×50次量)
2×Cycleave Reaction Mixture 625 μl Myco. Primer/Probe Mix (FAM、ROX) (5×conc.)*1 250 μl RNase Free dH2O 1 ml Myco.Positive Control*2 (1×106 Copies/μl) 20 μl Proteinase K 50 μl *1 荧光标记探针应避光保存。
*2 如果混入其他试剂中,会影响PCR反应的准确性,因此,建议同其他组份分开保存,以防止污染。
制品说明
本制品以支原体 (Mycoplasma) 的16S rRNA为目的基因,利用Real Time PCR对支原体进行高通量、特异性检出的试剂盒。使用本制品能高感度地检测出培养细胞中至少10种支原体M. arginini, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale, M. salivarium, M. fermentas, M. bovis,M. arthritidis,M. pirum,M. pneumoniae) 以及Acholeplasma属中的1种 (A. laidlawii)。
本制品使用了改良后的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,可以有效地抑制在配制反应液时发生的引物错配及引物二聚体引起的非特异性PCR扩增,大大提高PCR的检测灵敏度。
本制品采用Cycling Probe法进行检测,Cycling Probe法是由RNA和DNA构成的杂合探针与RNase H组合使用的高灵敏度检出法,能够高效率地检出扩增过程中及扩增结束时的目的基因片段。Cycling Probe内部含有RNA碱基,一端标记荧光物质,另一端标记荧光淬灭物质,当探针处于完整状态时,由于荧光淬灭作用抑制荧光物质发出荧光,但当探针与扩增产物中的互补序列杂交后,RNase H在RNA部分将探针切断,淬灭抑制作用解除,荧光物质发出荧光。通过测定荧光强度,能够实时监控扩增产物量。如果探针的RNA部分与模板不匹配,RNaseH就不能在RNA部分将探针切断。试剂盒中使用的探针是与支原体16S rRNA碱基互补的RNA,故可针对支原体进行高灵敏度的特异性检出。
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